Banca de DEFESA: FLÁVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : FLÁVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA
DATA : 17/02/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Remoto
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE LEISHMANICIDA in vitro DA LECTINA DE Dioclea Violacea MART. ex BENTH

PALAVRAS-CHAVES:

Leishmania infantum. Leishmaniose visceral. Dioclea violacea. Espécies reativas de oxigênio. Amastigotas. Permeabilidade. Lectina.

PÁGINAS: 65
RESUMO:

As leishmanioses são caracterizadas como um conjunto de doenças de interesse clínico e epidemiológico que possuem distribuição mundial. O tratamento para esta doença baseia-se primariamente no uso de antimoniais pentavalentes (Sb ⁺⁵), sendo no Brasil utilizado o antimoniato de meglumina (Glucantime®) e em alguns casos na aplicação de drogas secundárias, como a anfotericina B. Esses medicamentos apesar de promissores, apresentam diversas limitações e importantes efeitos colaterais, o que fomenta a pesquisa por novos medicamentos que apresentem baixa toxicidade e poucos efeitos adversos. Dentro deste cenário, destacam-se as lectinas, proteínas que apresentam diversas funções nos organismos em que são encontradas. O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito leishmanicida in vitro da lectina das sementes de D. violacea (DVL) em cultura de cepa de Leishmania infantum. Formas promastigotas foram incubadas com diferentes concentrações de DVL (324 – 5,06 μg/mL) e a viabilidade celular determinada por  contagem em câmara de Neubauer. Através determinação da CI₅₀ foi avaliada a participação do domínio de reconhecimento a carboidratos (DRC) na atividade da lectina. Ensaios de fluorescência com o diacetato de 2’,7’-diclorodihidrofluoresceína (DCFH2-DA) e Iodeto de Propídio (IP) foram realizados a fim de verificar a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e danos a integridade da membrana celular parasitária, respectivamente. Microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para avaliar as possíveis alterações morfológicas induzidas pela DVL em formas promastigotas. Também foi testado o efeito da associação entre a DVL e a Anfotericina B e o glucantime sobre formas promastigotas. Por meio do teste do brometo de 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2,5 difeniltetrazólio (MTT) foi possível determinar a citotoxicidade da DVL em macrófagos Raw 264.7, bem como o efeito da associação desta com a anfotericina B sobre estas mesmas células. Para mais, foi verificado ainda o efeito da DVL sobre formas amastigotas da cepa de L. infantum.  DVL inibiu o crescimento de formas promastigotas de maneira concentração e tempo dependentes, com valores CI_50/24h = 49,37 μg/mL; CI_50/48h = 37,47 μg/mL; CI_50/72h = 34 μg/mL. Os dados obtidos mostraram que a atividade da lectina esta relacionada à sua capacidade de reconhecer e se ligar a glicanos presentes em L. infantum e o tratamento com esta é capaz de induzir a produção de EROs, danos a integridade da membrana celular e alterações morfológicas nos parasitas. Além disto, a lectina mostrou-se capaz de modular a ação da anfotericina B e do glucantime melhorando o efeito destes em formas promastigotas.  DVL não apresentou citotoxicidade em células Raw 264.7, demonstrando um aumento da viabilidade destas células, efeito também observado na avaliação da associação entre a DVL e a anfotericina B sobre as células. Ademais, com o uso da CI₅₀ (50 μg/mL) foi possível observar uma redução no índice de sobrevivência dos macrófagos infectados com formas amastigotas, bem como uma redução no percentual de infecção dos mesmos. Os resultados sugerem que a DVL é uma ferramenta promissora para o tratamento das leishmanioses, entretanto mais estudos são necessários para elucidar os prováveis mecanismos de ação.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1250782 - CLAUDENER SOUZA TEIXEIRA
Presidente - 1353800 - CLAUDIO GLEIDISTON LIMA DA SILVA
Externo ao Programa - 1350490 - ESTELITA LIMA CANDIDO
Externo à Instituição - RODRIGO PEDRO PINTO SOARES - FIOCRUZ - RJ