Banca de QUALIFICAÇÃO: FLÁVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : FLÁVIA EDUARDA VIDAL BARBOSA
DATA : 28/01/2022
HORA: 14:00
LOCAL: Remoto
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE LEISHMANICIDA in vitro DA LECTINA de Dioclea Violacea Mart. ex Benth

PALAVRAS-CHAVES:

Palavras-chave: Leishmania infantum. Leishmaniose visceral. Dioclea violacea. Lectina. DVL.

PÁGINAS: 65
RESUMO:

As leishmanioses são caracterizadas como um conjunto de doenças de interesse clínico e epidemiológico que possuem distribuição mundial. O tratamento para esta doença baseiase no uso de antimoniais pentavalentes, primariamente, e em alguns casos na aplicação de drogas secundárias. Esses medicamentos apesar de eficientes, apresentam diversos problemas no seu uso e importantes efeitos colaterais, o que fomenta a pesquisa por novos medicamentos que apresentem baixa toxicidade e poucos efeitos adversos. Dentro deste cenário, destacam-se as lectinas, proteínas que apresentam diversas funções nos organismos em que são encontradas. Em pesquisas desenvolvidas com a lectina das sementes de Dioclea violacea (DVL) foi possível observar que a mesma possui especificidade de reconhecimento e ligação para manose/glicose e apresenta-se como uma ferramenta biológica com aplicações promissoras. O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito leishmanicida in vitro da lectina das sementes de D. violacea (DVL) em cultura de cepa de Leishmania infantum. Formas promastigotas foram incubadas com diferentes concentrações de DVL (324 – 5,06 μg/mL), a partir da determinação da CI50 foi avaliado a participação do domínio de reconhecimento a carboidratos (CRD) na atividade da lectina. A viabilidade celular foi avaliada por contagem em câmara de Neubauer. Ensaios de fluorescência com o diacetato de 2’,7’- diclorodihidrofluoresceína (DCFH2-DA) e o Iodeto de Propídio (IP) foram realizados a fim de verificar a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e danos a integridade da membrana celular parasitária, respectivamente. Além disto, foi realizada por meio de analise através de microscópio eletrônico de varredura a avaliação das alterações morfológicas induzidas pela DVL em formas promastigotas. Também foi testado o efeito da associação entre a DVL e a Anfotericina B e o glucantime sobre formas promastigotas. Por meio do teste do brometo de 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2,5 difeniltetrazólio (MTT) foi possível determinar a citotoxicidade da DVL em macrófagos Raw 264.7, bem como o efeito da associação desta com a anfotericina B sobre estas mesmas células. Para mais, foi verificado ainda o efeito da DVL sobre formas amastigotas da cepa de L. infantum. A DVL foi capaz de inibir o crescimento de formas promastigotas de maneira concentração e tempo dependentes, com valores CI50/24h = 49,37 μg/mL; CI50/48h = 37,47 μg/mL; CI50/72h = 34 μg/mL. Os dados obtidos mostraram que a atividade da lectina esta relacionadoà sua capacidade de reconhecer e se ligar a glicanos presentes em L. infantum e o tratamento com esta é capaz de induzir a produção de EROs, danos a integridade da membrana celular e alterações morfológicas nos parasitas. Além disto, a lectina mostrou-se capaz de modular a ação da anfotericina B e do glucantime melhorando o efeito destes em formas promastigotas. DVL não apresentou citotoxicidade em células Raw 264.7, demonstrando um aumento da viabilidade destas células, efeito também observado na avaliação da associação entre a DVL e a anfotericina B sobre as células. Ademais, com o uso da CI50 (50 μg/mL) foi possível observar uma redução no índice de sobrevivência de macrófagos infectados com formas amastigotas, bem como uma redução no percentual de infecção dos mesmos. Os resultados sugerem que a DVL é uma promissora alternativa para o tratamento das leishmanioses, entretanto mais estudos são necessários para elucidar os prováveis mecanismos de ação.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 1185176 - FRANCISCO NASCIMENTO PEREIRA JUNIOR
Presidente - 1528282 - MARCOS ANTONIO PEREIRA DE LIMA
Externo à Instituição - RACQUEL OLIVEIRA DA SILVA SOUZA - FJN