Banca de QUALIFICAÇÃO: ANDREZA GENY DE ARAUJO ANDRADE

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ANDREZA GENY DE ARAUJO ANDRADE
DATA : 28/06/2024
HORA: 09:00
LOCAL: Sala de Videoconferência da Faculdade de Medicina - UFCA (campus Barbalha)
TÍTULO:

ESTRESSE OXIDATIVO E COMPROMETIMENTO DO CRESCIMENTO INDUZIDOS POR FERRO E MANGANÊS EM BACILLUS SUBTILIS MUTANTE PPGPP0

PALAVRAS-CHAVES:

Palavras-chave: Bacillus subtilis, ppGpp0, Estresse oxidativo

PÁGINAS: 41
RESUMO:

A bactéria Bacillus subtilis é um organismo Gram-positivo, não patogênico, produtor de endósporos, forma biofilme, produz antibióticos lipopeptídicos e caracteriza-se como um microrganismo viável para realização de triagens antimicrobianas devido a proximidade evolutiva com Gram-positivos patogênicos. Nessas bactérias é produzido o nucleotídeo penta/tetrafosfato de guanosina (p)ppGpp que participa em diversos processos celulares mas na situação de carência nutricional essas bactérias começam a sofrer alterações que ativam a produção de (p)ppGpp em quantidades maiores para a regulação metabólica. O objetivo deste estudo foi entender o impacto da ausência da síntese de tetrafosfato de guanosina (ppGpp0) no crescimento celular e na toxicidade do ferro/manganês sob estresse oxidativo em Bacillus subtilis. As cepas Bacillus subtilis PY79 e ppGpp0 foram cultivadas em 20 mL de meio LB líquido com agitação ou em meio LB sólido, ambos a 37°C por 15 horas. O crescimento bacteriano foi medido na ausência ou presença de FeSO4 e MnSO4 em diferentes concentrações, a cada hora, durante 10 horas. Os níveis de peróxido de hidrogênio (H2O2) foram detectados usando AmplexRed/Peroxidase de rábano, e as atividades das enzimas antioxidantes (catalase e superóxido dismutase) foram avaliadas. A respiração celular foi medida usando um eletrodo tipo Clark. Os testes demonstraram que os mutantes ppGpp0 apresentaram um atraso no crescimento em relação ao controle PY79, e nenhuma das células cresceu em Fe2+ na concentração de 4mM. Em concentrações iguais ou inferiores a 1mM de FeSO4, Bacillus subtilis tolerou bem. No entanto, comparado ao tipo selvagem (PY79), a cepa mutante ppGpp0 exibiu uma sensibilidade significativamente aumentada a Fe2+, mostrando atraso na entrada na fase exponencial de crescimento. O mutante ppGpp0 produziu maiores níveis de H2O2 (na fase estacionária) quando estimulado por Fe2+ (2mM). O estresse induzido por Mn2+ causou um aumento acentuado na fase de latência do crescimento celular em Bacillus subtilis mutantes para ppGpp0. A presença desses metais induziu um incremento no consumo de oxigênio comparado às cepas sem Fe2+, e Mn2+. As enzimas antioxidantes não apresentaram diferenças significativas nas atividades. Nossos resultados sugerem que ppGpp é importante para a homeostase de ferro e manganês em Bacillus subtilis. Esses resultados também implicam que a intoxicação por ferro limita o crescimento através de um mecanismo relacionado ao estado redox.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - FRANCISCO NASCIMENTO PEREIRA JUNIOR
Presidente - HEBERTY DI TARSO FERNANDES FACUNDO
Externa à Instituição - JANAÍNA ESMERALDO ROCHA
Interna - MARIA ELIZABETH PEREIRA NOBRE